斑馬魚轉(zhuǎn)基因(斑馬魚轉(zhuǎn)基因?qū)嶒?yàn)報(bào)告)

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今天給各位分享斑馬魚轉(zhuǎn)基因的知識(shí),其中也會(huì)對(duì)斑馬魚轉(zhuǎn)基因?qū)嶒?yàn)報(bào)告進(jìn)行解釋,如果能碰巧解決你現(xiàn)在面臨的問(wèn)題,別忘了關(guān)注祥龍魚場(chǎng)哦,現(xiàn)在開始吧!最好做下細(xì)胞轉(zhuǎn)染,看看你用的報(bào)告基因表達(dá)沒(méi)有,一般會(huì)在載體里面加一段gfp之類的基因,這樣的話轉(zhuǎn)基因魚可以在熒光顯微鏡下觀察,以便于篩選成功的胚胎,不過(guò)你也可以同時(shí)做,即轉(zhuǎn)染細(xì)胞同時(shí)注射胚胎,這樣出了問(wèn)題可以直接分析,有一些細(xì)胞內(nèi)可以表達(dá)的注射后就不表達(dá)了,也遇到過(guò)這種情況,

今天給各位分享斑馬魚轉(zhuǎn)基因的知識(shí),其中也會(huì)對(duì)斑馬魚轉(zhuǎn)基因?qū)嶒?yàn)報(bào)告進(jìn)行解釋,如果能碰巧解決你現(xiàn)在面臨的問(wèn)題,別忘了關(guān)注祥龍魚場(chǎng)哦,現(xiàn)在開始吧!

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斑馬魚轉(zhuǎn)基因載體?是否需要轉(zhuǎn)染細(xì)胞檢測(cè)載體正常表達(dá)

最好做下細(xì)胞轉(zhuǎn)染,看看你用的報(bào)告基因表達(dá)沒(méi)有,一般會(huì)在載體里面加一段gfp之類的基因。這樣的話轉(zhuǎn)基因魚可以在熒光顯微鏡下觀察,以便于篩選成功的胚胎。不過(guò)你也可以同時(shí)做,即轉(zhuǎn)染細(xì)胞同時(shí)注射胚胎,這樣出了問(wèn)題可以直接分析。有一些細(xì)胞內(nèi)可以表達(dá)的注射后就不表達(dá)了,也遇到過(guò)這種情況。

你好,我想問(wèn)問(wèn)關(guān)于斑馬魚轉(zhuǎn)基因的一般試驗(yàn)方法。我是對(duì)轉(zhuǎn)基因沒(méi)有一點(diǎn)兒基礎(chǔ)的人。

序列到NCBI上去查,物種選Zebrafish或Danio rerio。

將目的基因與質(zhì)粒載體構(gòu)建重組質(zhì)粒,最好再接個(gè)報(bào)告基因,比如EGFP。

和I-SceI(大范圍核酸轉(zhuǎn)移酶)一起共顯微注射到單細(xì)胞期階段斑馬魚胚胎中(產(chǎn)后30分鐘),溶液配方

質(zhì)粒 0.5-1μl

I-SceI Buffer(10×) 1μl

I-SceI enzyme(5u/μl) 1μl

dd H20 補(bǔ)足10μl

質(zhì)粒終濃度 50-100ng/μl,注射量2nl/per。

斑馬魚轉(zhuǎn)基因(斑馬魚轉(zhuǎn)基因?qū)嶒?yàn)報(bào)告) 雙線側(cè)魚

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